بررسی امکان استفاده از نانوذرات کوانتئمی پوشش داده شده با آنتی بادیهای اختصاصی برای شناسایی candidatus phytoplasma aurantifolia عامل بیماری جاروک لیموترش

بررسی امکان استفاده از نانوذرات کوانتومی پوشش داده شده با آنتی بادی های اختصاصی در شناسایی candidatus phytoplasma aurantifolia عامل بیماری جاروک لیموترش فاطمه راد*، افشین محسنی فر، میثم طباطبایی پزوه، محمدرضا صفرنژاد، فاطمه شهریاری، آیدین فروتن، محسن مردی، داریوش داودی، محمدحسین فتوکیان چکیده: بیماری جاروک لیموترشdisease of acid lime (wbdl) witches’ broom یکی از مخرب ترین بیماری های باکتریایی درخت لیموترش در مناطق گرم جنوبی کشور ایران است که به وسیله candidatus phytoplasma aurantifolia ایجاد می شود. روش های سنتی از قبیل کنترل ناقلین و اقدامات قرنطینه ای، قابلیت محدودی در کنترل این بیماری دارند. بنابراین استفاده از تکنولوژی های نوین برای تشخیص به موقع بیماری جهت کاهش خسارات پیش رو می باید در نظر گرفته شود. در این راستا آنتی بادی های نوترکیب می توانند به عنوان راهکاری مناسب استفاده شوند. در این تحقیق از تکنیک های موثر، دقیق، سریع و ارزان نانوتکنولوژی برای تشخیص زودهنگام عامل بیماری زا استفاده شده است. آنتی ژن immunodominant membrane protein (imp) فیتوپلاسما عامل جاروک لیمو ترش که یک پروتئین چندکاره و ضروری جهت ایجاد بیماری در گیاه است، به عنوان هدف، جهت شناسایی به وسیله آنتی بادی های پلی کلونال پوشش داده شده در سطح نانوذرات کوانتومی در نظر گرفته شده است. در این راستا، ابتدا آنتی بادی های پلی کلونال علیه فیتوپلاسمای عامل جاروک لیمو ترش تولید شده و سپس در اطراف نقاط کوانتومی چیده شد. هم چنین، آنتی ژن imp نیز به ماده رنگی ردامین (گیرنده نور) اتصال داده شد و در نهایت کمپلکس دهنده-گیرنده در سیستم fluorescence resonance energy transfer (fret) به ترتیب qd- آنتی بادی- imp- ردامین آماده سازی شد. در این سیستم زمانی که نمونه مورد آزمایش آلوده به imp بود، سبب جایگزین شدن imp آزاد با imp متصل شده با ردامین شد. نتیجه این جایگزینی افت پیک نمودار بود. این در حالی است که نمونه سالم به دلیل فقدان imp تغییری در پیک نمودار ایجاد نکرد. حسگر زیستی ارائه شده صد در صد اختصاصی بوده و علاوه بر رقت نهایی 5تشخیص فیتوپلاسما در هر ماکرولیتر عصاره، پایداری قابل ملاحظه ای را دارا می باشد. هم چنین تا به حال گزارشی از تهیه این ترکیب برای شناسایی فیتوپلاسما ارائه نشده است. کلمات کلیدی: بیماری جاروک لیموترش، candidatus phytoplasma aurantifolia، پروتئین پوششی فیتوپلاسما(imp) ، نقاط کوانتومی، سیستم fret *تلفن: 09126904376 پست الکترونیکی: [email protected]